"Hand Ripped Virus" P3 Laboratuarının Gizemini Çözüyor
"Virüsün 'sıfır mesafede' temas ettiği yer burası. Tüm laboratuvar tamamen kapalı ve oda negatif basınç altında. Bunu tanımlamak için" üç akış "terimini, yani tek yönlü insan akışı, lojistik ve hava akışını kullanmayı seviyoruz. Guangdong Eyaleti İkinci Halk Hastanesinin P3 laboratuvarının yöneticisi Lin Jianguo, kirleticiler dışarıya sızmayacak ve kirliliğe neden olmayacak. "Dedi.
"Burada", P3 laboratuvarını ifade eder. Her gün, Guangdong Eyaleti İkinci Halk Hastanesinde 400'den fazla yeni koroner pnömoni nükleik asit testi yapılmaktadır.
Ülkedeki ilk eyalet acil durum hastanesi olan Guangdong Eyaleti İkinci Halk Hastanesi, ulusal bir acil tıbbi kurtarma ekibine, bir DSÖ uluslararası acil sağlık ekibine ve virüsle mücadelede kapsamlı deneyime sahiptir. P3 laboratuvarı, hastanenin "el yırtma virüsünün" gizli silahlarından biridir.
Şimdi, hastanenin P3 laboratuvarının gizemini ortaya çıkaralım ve virüsün P3 laboratuvarında nasıl "seçildiğini" görelim.
Sır Bir: Geçmiş ve Bugün
P3 laboratuvarı, üçüncü düzey bir biyogüvenlik koruma laboratuvarıdır ve P, Koruma'nın kısaltmasıdır. Laboratuvarın tamamı tamamen sızdırmaz hale getirilmiş ve oda negatif basınç altındadır, böylece laboratuvar içindeki gaz dışarıya sızmaz ve tek bir "hava akışı" akışı olan kirliliğe neden olmaz.
Biyogüvenlik koruma laboratuvarları, mikroorganizmaların ve toksinlerinin zarar derecelerine göre en düşük ve en yüksek seviyede olmak üzere dört seviyeye ayrılır. Birinci düzey biyogüvenlik koruma laboratuvarı, sağlıklı yetişkinler üzerinde patojenik etkisi olmayan mikroorganizmalar için uygundur; ikinci düzey, insanlara ve çevreye orta düzeyde zarar verme potansiyeline sahip mikroorganizmalar için uygundur; üçüncü düzey, özellikle solunum yolları yoluyla ciddi ve hatta ciddi enfeksiyonlar için uygundur. Patojen mikroorganizmalar veya ölümcül hastalıkların toksinleri; Seviye 4, insan vücudu için oldukça tehlikeli olan, aerosollerle bulaşan veya bilinmeyen patojenik mikroorganizmalar veya toksinleri için geçerlidir ve etkili bir aşı veya tedavi yöntemi yoktur.
Guangdong Eyaleti İkinci Halk Hastanesinde yeni koronavirüs nükleik asit testi P3 laboratuvarında gerçekleştirildi.
Lin Jianguo, hastanenin P3 laboratuvarının sloganının 3P, Barış zamanı savaşı, Önlem ve İlerleme olduğunu söyledi. Barış zamanı ve savaş zamanı kombinasyonu: Normalde, bilimsel araştırma ana yapıdır ve düzenli olarak acil durum tatbikatları yapılır.Bir salgın meydana geldiğinde, derhal acil çalışma durumuna girer. Alarm zilleri çalıyor: Her zaman kafanızı net tutun, küresel ve yerel bulaşıcı hastalık araştırma trendlerine çok dikkat edin ve önleyici tedbirler alın. Zamana ayak uydurun: Yeni uluslararası bilgi, yeni teknoloji ve yeni ekipmanı zamanında takip edin ve uluslararası bakış açısıyla bir laboratuvar kurun.
Gizli İki: Kozayı Soymak
Nükleik asit testi, yeni koroner pnömoni teşhisi için "altın standarttır" ve test sürecindeki her bağlantı hassas ve özensizdir. Operasyon sırasında deneyci, önündeki örneklerle yüzleşti ve şüphesiz virüsle doğrudan bir yüzleşme olan "kapağı tek tek açıp, örnekleri eklemek ve nükleik asit çıkarmak için kapağı açmaya" ihtiyaç duydu.
P3 laboratuvarındaki deneyciler virüsü adım adım nasıl "kırdı"? Raporlara göre, laboratuvardaki test süreci 5 adıma bölünebilir: örnek "transfer penceresine" girer - inaktivasyon muamelesi - kapaksız örnek ekleme ve çekirdek ekstraksiyon-amplifikasyon reaksiyonu sonucu - otoklavlama.
İlk adım, numuneyi laboratuvara girmektir. Boğaz swabları veya anal swablar gibi toplanan test numuneleri P3 laboratuvarına girmeden önce özel bir pencereye girmelidir - "geçiş penceresi" Bu pencereye hava kilidi de denir.Aynı anda açılamayan çift kapılar vardır. Numunelerin aktarılması sırasında içeri alınan hava çift kapılı olarak izole edilerek laboratuvar dışı ortamın kirlenmemesi sağlanır. Bu aynı zamanda, numunenin kaderinin başlangıç noktası olan "üç akım" ın "lojistiğidir", burada laboratuvardaki kısa ömrüne başlamaktır.
Şekil 1 "İletim penceresi" aynı zamanda Air Lork (hava kilidi) olarak da adlandırılır
İkinci adım, tespit edilmeden önceki inaktivasyon tedavisidir, ki bu zorunlu olmamakla birlikte nispeten güvenlidir. Örnek, 56 ° C'lik yüksek sıcaklıktaki bir su banyosunda yarım saat süreyle inaktive edilecek, böylece virüs proteini artık fizyolojik aktiviteye sahip olmayacak ve bulaşma, hastalığa neden olma ve çoğalma yeteneğini yitirecektir.Örnek test edilirken nispeten güvenli olacaktır, ancak virüs proteininin genetik dizisi değil Etkilenmemiş.
Şekil 2 Kapaksız numunelerin ve nükleik asit ekstraksiyonunun yapıldığı numune işleme odası
Üçüncü adım, kapağın açılması ve numunelerin eklenmesi ve nükleik asit ekstraksiyonunun test edilmesinin çekirdek kısmıdır.
Guangdong Eyaleti İkinci Halk Hastanesinin Laboratuvar Tıbbı Bölümünün baş teknisyen yardımcısı Hu Liangshan, ekipman hata ayıklama, program ayarı ve reaktif denemesi gibi ön hazırlıkları tamamlamak için P3 negatif basınç laboratuvarına giren ilk kişiydi. Deneyci inaktive edilmiş numuneyi aldığında, numune işleme odasında ilk eylemin sallamak, swab üzerindeki virüsün orta solüsyonda ayrıştırılması ve ardından çökelmesi için beş dakika bekletilmesi olduğunu söyledi. Bir sonraki adım, kapağı açmak ve manuel olarak çalıştırılması gereken ve iki kişi arasında yüksek derecede işbirliği gerektiren numuneyi eklemektir.Bir kişi numune tankının kapağını açar ve diğer kişi bir mikropipet alarak numune tankından az miktarda solüsyon çekip başka bir ekstraksiyon tüpüne koyar. İçeride, ardından kapağı vidalayın. Bu şekilde, deneyci ve virüs yüz yüze "yırtılma" ile her seferinde 400'den fazla numunenin 400'den fazla kez açılıp aktarılması gerekiyordu.
"Numune açılıp aktarıldığında, virüs laboratuvarda havaya maruz kalması çok kolaydır. Elinizin altında ve bizimle neredeyse sıfır mesafeli temas halindedir." Hu Liangshan, "Kapağı açıp numuneyi eklerken, tutun Mikro pipetlerin elleri genellikle gariptir çünkü çift eldiven giyerler, ancak dikkatli olmaları gerekir.Göz maskesi, yüz ekranı ve biyolojik güvenlik kabininin cam penceresinin üçlü bariyeri ile birleştiğinde tüm hareketler yavaş görünür. Hareketler yavaş, yorgun ve zaman zaman titriyor, genellikle sol elin sağ elini tutarak örneği tamamlamasıyla. "
Yapay nükleik asit ekstraksiyonunun adımları daha karmaşıktır ve test, deneycilerin sabır ve dikkatidir. "Nükleik asit ekstraksiyonu aletlerle desteklenebilir, ancak karşılaştırma ihtiyacından dolayı genellikle manuel işlemler gerekir. Bu, aralarında 7'den fazla işlemin açılması gereken tekrarlanan santrifüjleme, reaktif ekleme ve yıkama adımları gerektirir. Yapay bir nükleik asit ekstraksiyonunun tamamlanması yaklaşık 50 dakika sürer. Hu Liangshan dedi.
Dördüncü adım, sonucu yargılamaktır. Çıkarılan nükleik asit, nükleik asit test odasına gönderilir ve cihaz kurulmak üzeredir. Deneyci, ekstrakte edilmiş nükleik asidi amplifikasyon reaktifine ekler ve bir floresan PCR makinesi ile RT-PCR reaksiyonunu gerçekleştirir.Sonucun negatif mi yoksa pozitif mi olduğunu analiz etmek ve belirlemek yaklaşık 110 dakika sürer.
Şekil 3 Nükleik asit amplifikatörü ile amplifikasyon reaksiyonu
Şekil 4 Eğrilere ve parametrelere dayalı analiz ve değerlendirme sonuçları
Son adım, kontaminantların otoklavlanmasıdır. Deney sırasında üretilen kir otoklavlandıktan sonra, sıradan tıbbi atık olarak işlem görecektir. "Lojistik" in sonu burada bitiyor.
Şekil 5 Otoklavlamadan sonra, oluşan kir ilgili tıbbi atık olarak işlem görür.
Gizli Üç: Güvenlik
"Üçüncü sınıfta" "insan akışı" nedir? Personelin nasıl çalıştığını görelim.
İlk olarak, temiz alanda ara koruyucu giysiler giyin - laboratuvardaki negatif basınçlı çalışma odasına örnek işleme, nükleik asit ekstraksiyonu ve testlerin yapıldığı tampon odasından girin - alan ve yüzey dezenfeksiyonu tamamlandıktan sonra koruyucu giysiyi sırayla çıkarın -Duşta kıyafet değiştirdikten sonra temizlik alanına geri dönün. Bu adımların hiçbiri atlanamaz!
Nükleik asit testinin amacı verimli, düzenli ve güvenli olmaktır. Personelin güvenliği en önemli önceliktir. Güvenliği sağlamak için Guangdong Eyaletindeki İkinci Halk Hastanesi çeşitli önlemler aldı. Birincisi, personel seçimi.Salgınla mücadele için seferberlik emrinin çıkarılmasının ardından birçok kişi hevesle kaydoldu. Tekrarlanan taramalardan sonra, sağlıklı ve iyi eğitimli tüm genç "gaziler" geride bırakıldı; ikincisi, iş öncesi güvenlik eğitimi katı oldu Koruyucu giysiler giyin ve operasyon sürecine aşina olun; üçüncü, sıkı dezenfeksiyon ve sterilizasyon sistemi, hastanenin P3 laboratuvar yöneticisi Yan Xiukui her gün tüm dezenfeksiyon sürecinden sorumludur; dördüncü olarak, negatif basınç alanı çalışanlarını zamanında tespit etmek için bir duyusal kontrol denetleme sistemi kurun Rahatsızlık veya yanlış kullanım durumunda personelin fiziksel ve ruhsal güvenliğini sağlamak için gerekli tedaviyi yapın.
Raporlara göre, şu ana kadar hastanenin P3 laboratuvarında herhangi bir biyogüvenlik sorunu görülmedi.
Şekil 6 Laboratuvara tampon odasından giriş
Gizli Dört: Sahte olanı atın ve gerçeği saklayın
P3 laboratuvarında, herhangi bir bağlantıdaki sorunlar "yanlış negatiflere" veya "yanlış pozitiflere" yol açabilir. Testin kalitesini sağlamak için test sonuçları çok sayıda karşılaştırma ve incelemeden geçecektir.
Raporlara göre, test kalitesinin test edilmeden önce çoktan başlatıldığından emin olun. Numune toplama için tıbbi personel, çalışmadan önce titiz bir eğitimden ve değerlendirmeden geçmelidir. Numunenin kalitesi, toplama teknolojisi ile yakından ilişkilidir.Her bir eylem çerçevesi, düzenlemelere uygun olarak gerçekleştirilmelidir. Numune alımından sonra eskort çalışması sıkı prosedürleri takip etmelidir. Laboratuvara özel bir kişi tarafından teslim edildi.
Tespit işlemi sırasında, deneyci her testi dikkatli bir şekilde ele alır ve herhangi bir şüpheli örneği gözden kaçırmaz. Şüpheli örnekler için, "yanlış negatiflerin" oluşmasını önlemek için gözden geçirilmek üzere farklı reaktifler seçilecektir; aynı zamanda, her deney grubu için üçten fazla boş kontrol rastgele yerleştirilecek ve virüs genleri dizilenecek ve pozitif örnekler için karşılaştırılacaktır. "Yanlış pozitiflerin" oluşmasını önlemek için.
Testten sonra, laboratuvar test edilen numuneleri düzenli olarak rastgele seçecek ve test için üçüncü taraf bir laboratuvara gönderecek ve testin doğruluğunu sağlamak için veriler karşılaştırılacak ve analiz edilecektir.
Gizli Beş: Yenilmez
"Gözcü" olarak bilinen hastanenin KÖO denetim ekibi şu anda 21 kişiye sahip ve günde üç vardiya çalışıyor. Test ekibinin% 70'inden fazlası yüksek lisans derecesine sahip, tümü moleküler biyoloji eğitimi almış ve PCR iş sertifikalarına sahip.
Lin Jianguo, "Koğuşta savaşan tıbbi personelden farklılar. Laboratuvarda saklanıyorlar ve her gün virüsle yakın temasta bulunuyorlar. Başkaları için görünmeyen 'ön saflar." Dedi.
Lin Jianguo, laboratuvar yöneticisi olarak 2002 yılında Huazhong Bilim ve Teknoloji Üniversitesi'nden bulaşıcı hastalıklar alanında bir tıp doktoru aldı. ABD Hastalık Kontrol Merkezlerinde, Emory Üniversitesi'nde ve Saint Louis Üniversitesi'nde 14 yıldır viral patogenez ve aşı geliştirme çalışmalarında bulundu. Patojenik virüslerin tedavisi ve biyogüvenlik konusunda zengin deneyim biriktirdik.
Laboratuvar, "Yeni Koronavirüs Pnömonisi Teşhis ve Tedavi Planı" ve biyogüvenlik gerekliliklerine kesinlikle uymaktadır. Müfettişlerin, P3 laboratuvarının negatif basınçlı kapalı alanında Seviye 3 koruyucu ekipman giymeleri, 5 saat boyunca yemek yememeleri veya içmemeleri ve hatta sorunu çözmek için yetişkin bezleri giymeleri gerekir. Negatif basınç farkı ve sıkı ekipman nedeniyle tuvalete gitme, baş dönmesi ve kusma gibi semptomların üstesinden gelme ihtiyacı.
Sadece bu da değil, müfettişlerin psikolojik korkuların üstesinden gelmesi gerekiyor. Boğaz sürüntü örneği şüpheli hastanın nazofarenksinden toplanmıştır ve daha fazla yeni koronavirüs içerebilir. Müfettişler, numune alma tankından numuneleri çıkardıklarında, kapalı bir ortamda havaya yayılması kolaydı, ancak yine de şikayet etmeden cephede savaştılar ve ilk geçişi aldılar.
Şekil 7 Dr. Lin Jianguo, P3 Lab Direktörü
