COVID-19'lu hastalar iyileştikten sonra tekrar veya yeniden enfeksiyon mu olacak? İlk yeni koronavirüs antikor çalışması okumaya değer
14 Nisan'da Wuhan Belediyesi Sağlık Komisyonu, yeni taç virüsün asemptomatik enfeksiyonlarının seroepidemiyolojik bir araştırmasını başlattı. Bu anket sabit noktalı rastgele örnekleme ilkesini benimsedi. Toplam yaklaşık 11.000 kişiyle anket noktaları olarak toplam 100 topluluk kullanıldı. Bu serum akış ayarlamasının sonuçları ortaya çıkmadan önce, yeni koroner hastalığı olan hastaların serumundaki antikorlar hakkında gittikçe daha fazla tartışma yapılmıştır.
Son zamanlarda, Fudan Üniversitesi, Fudan Üniversitesi Temel Tıp Fakültesi Patojenik Biyoloji Bölümü ve Tıbbi Moleküler Viroloji Anahtar Ofisi'ne bağlı Şangay Halk Sağlığı Klinik Merkezi'nden bir araştırma ekibi, Eğitim Bakanlığı / Sağlık Bakanlığı başlıklı bir "medRxiv" yayınladı. Bir COVID-19 kurtarılmış hasta kohortunda SARS-CoV-2'ye karşı nötralize edici antikor tepkileri ve bunların etkileri "araştırma makalesi. Araştırma henüz hakem tarafından değerlendirilmemiştir.
Araştırma sonuçları şunu gösteriyor: 175 iyileşmiş hastadan alınan serum örneklerinin analizi, nötralize edici antikorların (Nabs) hastanın hastalığının başlamasından 10-15 gün sonra zirveye ulaştığını ve daha sonra stabil kaldığını buldu. Hastaların% 30'u çok düşük nötralize edici antikor titreleri üretti Bunlar arasında, iyileşen 10 hastadaki antikor titreleri saptanabilir sınıra ulaşmadı. 2 hastanın nötralize edici antikor titreleri çok yüksekti, ancak antikorla ilgili hiçbir yan etki görülmedi.
Araştırma ekibi, bu sonuçların şunu gösterdiğini kaydetti: Yeni koronavirüs ile enfekte olan bazı hastalar, virüse özgü antikorların yüksek titreleri ortaya çıkmadan iyileşebilir. Bu hastaların, nötralize edici antikorların yardımı olmadan nasıl iyileştiği ve tekrarlayan hastalık veya yeniden enfeksiyon riskinin daha yüksek olup olmadığı, daha fazla araştırılmayı beklemektedir.
Bu çalışmada, COVID-19 hastalarının nötralize edici antikor titresinin hastanın yaşı ile de ilişkili olduğunu bulduğunu belirtmek gerekir Orta yaşlı ve yaşlı hastalar tarafından üretilen nötralize edici antikor titresi, genç hastalardan çok daha yüksektir.
Çalışmanın ilgili yazarları, Fudan Üniversitesi Temel Tıp Okulu'nda profesör olan Huang Jinghe ve Fudan Üniversitesi'ne bağlı Şangay Halk Sağlığı Klinik Merkezi'nde yardımcı araştırmacı olan Wu Fan'dır. Huang Jinghe, uzun süredir AIDS geniş spektrumlu nötralize edici antikorları ve grip aşılarını araştırmakta ve antikorları doğrudan B lenfositlerinden izole etmek için yeni bir teknolojinin geliştirilmesine öncülük etmiştir (Nature Protocols 2013). Önceki araştırma çalışmasında, AIDS hastalarından bir dizi yeni yüksek verimli geniş spektrumlu nötralize edici antikorlar 10E8, 35O22 ve N6 izole edilmiştir.
Bu son çalışma, COVID-19 iyileşme hastalarından oluşan bir kohortun plazmasından nötralize edici antikorların çıkarılmasına ilişkin ilk araştırma raporudur ve plazma tedavisi ve yeni koronavirüse karşı aşıların geliştirilmesi gibi pasif antikor tedavisi için yararlı bilgiler sağlayabilir. Nötralize edici antikor titresi ile hasta yaşı, lenfosit sayısı ve kan CRP seviyesi arasındaki korelasyon, COVID-19 hastalarında nötralize edici antikor mekanizmasının daha fazla araştırılması için de temel oluşturdu.
Halihazırda, nötralize edici antikorların virüs temizlenmesinde önemli bir rol oynadığı ve viral hastalıkları korumak veya tedavi etmek için kullanılabileceği bilinmektedir. Enfeksiyon veya aşılama ile indüklenen virüse özgü nötralize edici antikorlar, viral enfeksiyonları bloke etme yeteneğine sahiptir. Nötralize edici antikorların seviyesi, aşıların çiçek hastalığı, çocuk felci ve grip virüslerine karşı etkinliğini değerlendirmek için altın standart olarak da kullanılmıştır.
Aynı zamanda, plazma tedavisi gibi pasif antikor tedavisi, SARS-CoV, influenza virüsü ve Ebola virüsü dahil olmak üzere bulaşıcı viral hastalıkları tedavi etmek için başarıyla kullanılmıştır. Pasif antikor tedavisinin etkinliği, plazmadaki nötralize edici antikorların konsantrasyonu veya iyileşmiş hastalarda antikorların konsantrasyonu ile ilgilidir. COVID-19 küresel salgını bağlamında, plazma tedavisi de ümit verici bir enfeksiyon önleme veya hastalık tedavisi yöntemi olarak kabul edilir.
Bununla birlikte, araştırma ekibi COVID-19 hastalarında yeni koronavirüse özgü nötralize edici antikorların seviyesinin ve rolünün henüz bildirilmediğini belirtti. Bu nedenle, Şangay Halk Sağlığı Klinik Merkezi'nden iyileşen hafif semptomları olan 175 hastanın plazmasını taramak ve belirlemek için psödovirüs-lentiviral vektörlere dayalı güvenli ve hassas bir nötralizasyon analizi yöntemi kullandılar.
Pseudovirus (PsV) nötralizasyon testi hassas ve tekrarlanabilir bir yöntemdir.Yüksek derecede patojenik virüsler üretmez ve biyogüvenlik ikincil tesislerinde güvenle işlenebilir. Bu yöntem daha önce çeşitli yüksek derecede patojenik virüsler için (Ebola virüsü, oldukça patojenik influenza virüsü, SARS-CoV ve MERS-CoV dahil) nötralize edici antikorların saptanmasında yaygın olarak kullanılmıştır.
26 Şubat 2020 itibarıyla toplam 175 COVID-19 hastası iyileşti ve Şangay Halk Sağlığı Klinik Merkezi'nden taburcu edildi. Semptomları hafiftir ve kimse yoğun bakımda bulunmamıştır. Hastaların ortanca yaşı 50'dir (16-85 yaş); kadın hastalar% 53'dür. Medyan hastanede kalış süresi 16 gün (7-30 gün) ve medyan hastalık süresi 21 gün (9 ila 34 gün) idi.
Çin Tıp Bilimleri Akademisi Tıbbi Laboratuar Hayvanları Enstitüsü müdürü Qin Chuan ve diğerlerinin daha önce al yanaklı maymunlar hakkında ilgili bilgiler verdiklerini ve cevabın bundan daha iyi olduğunu belirtmek gerekir. Huang Jinghe ve diğerlerinin araştırması nispeten iyimserdir.
Araştırma ekibi tarafından yapılan mevcut uzunlamasına maymun çalışmasından, maymunlar ilk enfeksiyondan hemen sonra nötralize edici antikorlar üretirse, yeniden enfeksiyon oluşmayacağını analiz ettiler. Bu aynı zamanda, iyileşen hastalar yeni koronavirüse karşı bağışıklık oluşturmak için yeterli spesifik antikor oluşturduklarında artık enfekte olmayacakları anlamına gelir. Hastaneden taburcu edilen hastaların "gençleşmesinin" yeniden enfeksiyondan kaynaklanamayacağına ve nedenini bulmak için daha karmaşık konuların dikkate alınması gerektiğine inanıyorlar. "
Yeni koronavirüs ve SARS-CoV'nin epitopu veya immünojenitesi farklıdır.
Araştırma ekibi, hastaneden taburcu edilirken 5 COVID-19 hastasından plazma örnekleri topladı ve 293T / ACE2 hücrelerinin yeni koronavirüs enfeksiyonuna karşı nötralize edici gücünü test etti. 5 plazma vakasının tümü, 293T / ACE2 hücrelerinin yeni koronavirüs PsV enfeksiyonunun konsantrasyona bağlı inhibisyonunu gösterdi. Nötralize edici antikorların yüksek titreli plazma, yeni koronavirüs RBD, S1 ve S2'ye özgü bağlanma antikorlarının daha yüksek titrelerini gösterdi.
Ek olarak, bu hastaların plazması da yeni koronavirüs RBD ve S1 bölgeleri ile çapraz bağlanma gösterdi, ancak SARS-CoV S proteinine bağlanma, yeni koronavirüs S proteininin bağlanması ile tutarlı değil. Ek olarak, PsV nötralizasyon testinde, COVID-19 hastalarının plazması SARS-CoV enfeksiyonunu engelleyemez.
Yeni koronavirüsün güçlü nötralize edici aktivitesi gösteren COVID-19 hastalarından alınan 26 plazma örneği, SARS-CoV PsV enfeksiyonunu nötralize edemedi veya VSV-G PsV enfeksiyonunu inhibe edemedi.
Burada, yeni koronavirüs ile S proteini üzerindeki SARS-CoV arasındaki amino asit özdeşliği% 77,2 olduğu için, iki virüs arasında korunmuş epitopların var olabileceği yönünde bir öncül var. Bununla birlikte, bu çalışmanın sonuçları, COVID-19 hastalarının plazmasının SARS-CoV ile çapraz bağlanma göstermesine rağmen, SARS-CoV'yi nötralize etmediğini gösterdi. Bu, yeni koronavirüs ve SARS-CoV'nin epitopu veya immünojenisitesinin farklı olduğunu gösterir.
Araştırma ekibi, bu çalışmadan elde edilen kanıtların yalnızca COVID-19 enfeksiyonu döneminde, SARS-CoV'nin korunmuş epitoplarına ve yeni koronavirüse karşı çapraz nötralize edici antikorların kolayca indüklenemeyebileceğini gösterdiğini belirtti.
Hasta, enfeksiyondan sonraki 10-15. Günlerde nötralize edici antikorlar ve bağlayıcı antikorlar üretir.
Araştırma ekibi, hastalığın seyri sırasında yeni koronavirüse özgü nötralize edici antikorların gelişim kinetiklerini izledi ve hastalığın başlangıcından sonra farklı zaman noktalarında 6 hastanın plazmasını ölçtü.Nötralize edici antikorların gelişme kinetiği, hastalar arasında benzerdi. Tüm hastalarda nötralize edici antikor titreleri, başlangıcın 10. gününden önce düşüktü (ID50: < 200), artış başlangıcından 10-15 gün sonra zirveye ulaşır ve daha sonra sabit kalır.
Araştırmacılar ayrıca, bu 6 hastanın plazmasındaki yeni koronavirüs S proteininin (spike glikoprotein) farklı bağlanma alanlarının (RBD, S1 ve S2) bağlanma antikorlarını da test ettiler. Nötralize edici antikorların (sağ Y ekseni) ve RBD'ye (reseptör bağlanma alanı), S1 ve S2'ye (sol Y ekseni) karşı antikorların bağlanma kinetiği tutarlıdır.
S proteini, koronavirüsün en önemli yüzey proteinidir.Genellikle virüsün konakçı aralığını ve özgüllüğünü belirler. Konakçı nötralize edici antikorlar için önemli bir bölge ve aşı tasarımı için anahtar bir hedeftir. Önceki çalışmalar, koronavirüslerin ACE2 reseptörüne S proteini yoluyla bağlandığını, böylece membran füzyonuna ve virüs istilasına aracılık ettiğini göstermiştir. S proteini, protein yapısına ve işlevine göre S1 ve S2 protein alt birimleri olmak üzere iki işlevsel birime ayrılır.
Araştırma ekibi, taburculuk gününde 175 iyileşmiş hastanın plazmasındaki yeni koronavirüse özgü nötralize edici antikorların titrelerini ve S protein bağlayıcı antikorların seviyelerini değerlendirdi. Yeni koronavirüse özgü nötralize edici antikorların titrelerinin, RBD, S1 ve S2'yi hedefleyen S protein antikorları ile orta derecede ilişkili olduğunu gözlemlediler.
Bunun, COVID-19 hastalarının yeni koronavirüse karşı humoral bağışıklık tepkisinin enfeksiyondan 10-15 gün sonra ortaya çıktığını gösterdiğine inanıyorlar. RBD bağlanma alanına ek olarak S2 bölgesi, yeni koronavirüs nötralize edici antikorun hedefi olabilir.
Bununla birlikte, bağlanma antikoru, virüsü antikora bağlı fagositoz veya antikora bağımlı sitotoksisite yoluyla da temizleyebildiğinden, nötralize edici antikor ve bağlayıcı antikorun hastalığın ilerlemesi üzerindeki etkisi, daha kapsamlı bir değerlendirmeyi hak eder.
Genel olarak, çoğu COVID-19 hastası, iyileşme döneminde yeni koronavirüse özgü nötralize edici antikorlar geliştirmiştir. Nötralize edici antikor titresi, hastalığın başlangıcından 10-15 gün sonra zirveye ulaşır ve daha sonra hastada stabil kalır. S proteininin farklı alanlarına (S1, RBD ve S2 dahil) karşı antikorlar nötralize etmeye yardımcı olabilir.
İyileşen hastaların yaklaşık% 30'u çok düşük titrelerde nötralize edici antikor üretir
Araştırma ekibinin, iyileşen 175 hastanın plazma nötralize edici antikor titrelerinin farklı olduğunu gözlemlediğini belirtmek gerekir. ID50'ler algılama sınırının altından ( < 40) 21567'ye kadar. İyileşen hastaların yaklaşık% 30'u çok düşük seviyede nötralize edici antikor titresi üretir (ID50: < 500). Ancak bu hastaların seyri diğer hastalara benzer.
10 hastanın nötralize edici antikor titresi hala tespit limitinin altındaydı (ID50: < 40). Bunun, T hücreleri veya sitokinler de dahil olmak üzere diğer bağışıklık tepkilerinin bu hastaların iyileşmesine yardımcı olabileceğine inanıyorlar.
Öte yandan, 2 hastanın nötralize edici antikor titreleri, sırasıyla 15989 ve 21567'den daha yüksek ID50 ile çok yüksekti, ancak antikorla ilişkili yan reaksiyonlar yoktu.
Genel olarak, hastaların yaklaşık% 17,% 39 ve% 14'ü orta-düşük (ID50: 500-999), orta-yüksek (ID50: 1000-2500) ve yüksek (ID50: > 2500) Nötralize edici antikor titresi.
Araştırma ekibi ayrıca taburcu olduktan iki hafta sonra takip muayeneleri sırasında 175 hastadan 47'sinin plazmasındaki nötralize edici antikor seviyelerini topladı ve test etti. Şekil 3C'de gösterildiği gibi, takip incelemeleri sırasında toplanan nötralize edici antikor plazma titreleri ile taburcu olurken toplananlar arasında önemli bir fark yoktu. Taburculuk sırasında nötralize edici antikorlar geliştirmeyen hastalar, daha sonra nötralize edici antikorlar geliştirmedi.
Bu sonuçların, yeni koronavirüs ile enfekte olmuş bazı hastaların virüse özgü antikorların yüksek titreleri olmadan iyileşebileceğini gösterdiğine inanıyorlar. Bu hastaların, nötralize edici antikorların yardımı olmadan nasıl iyileştiği ve tekrarlayan hastalık veya yeniden enfeksiyon riskinin daha yüksek olup olmadığı, daha fazla araştırılmayı beklemektedir.
Önleme veya tedavi için nekahat plazmasını kullanmadan önce ve pasif antikor tedavisinden önce kurtarma vericiden plazma ve serumun titre edilmesinin faydalı olduğu unutulmamalıdır. Araştırma ekibi, bunun da basit bir görev olduğunu ve PsV nötralizasyon testi kullanılarak yapılabileceğini hatırlattı.
Orta yaşlı ve yaşlı iyileşmiş hastalarda daha yüksek seviyelerde nötralize edici antikorlar vardır
COVID-19 hastalarının nötralize edici antikor titresi de hastanın yaşı ile ilgilidir.
Araştırma ekibi, yaşlı hastaların daha genç hastalara göre daha yüksek nötralize edici antikor titreleri indükleme olasılığının daha yüksek olduğunu gözlemledi. Şekil 4A'da gösterildiği gibi, hastaları yaşlarına göre genç (15-39 yaş), orta yaşlı (40-59 yaş) ve yaşlı (60-85 yaş) olmak üzere her gruptaki hasta sayılarına göre üç gruba ayırmışlardır. Sırasıyla 55 vaka, 64 vaka ve 56 vaka neredeyse aynı.
Orta yaşlı ve yaşlı iyileşmiş hastaların nötralize edici antikor titreleri, iyileşmiş genç hastalarınkinden önemli ölçüde daha yüksekti ve karşılık gelen medyan ID50'ler sırasıyla 1537, 1255 ve 488 idi. Yaş ve nötralize edici antikor titresi, orta derecede pozitif korelasyon gösterir ve yaşın nötralize edici antikor üretiminde önemli rolünü teyit eder. Orta yaşlı ve yaşlı iyileşmiş hastaların antikorlarını hedefleyen RBD, S1 ve S2, genç iyileşmiş hastalardan önemli ölçüde daha yüksekti. Ancak hastanın yaşı ile hastanede kalış süresi arasında fark gözlenmedi.
Araştırma ekibi, bu sonuçların, yüksek seviyelerde nötralize edici antikorların, virüsü temizlemede belirli bir etkiye sahip olduğunu ve orta yaşlı ve yaşlı hastaların iyileşmesine yardımcı olduğunu gösterdiğine inanıyor.
Ek olarak, COVID-19'dan iyileşen hastaların yaşı ve yeni koronavirüse özgü nötralize edici antikor, başvuru sırasındaki lenfosit sayısı ile negatif korelasyonludur ve CRP seviyeleri ile pozitif olarak ilişkilidir.
Mevcut araştırmaların, yaşın koronavirüs enfeksiyonundan sonra (SARS-CoV, MERS-CoV ve yeni koronavirüs dahil) kötü hastalık prognozunun önemli bir prediktörü olduğunu gösterdiğini belirtmek gerekir. SARS-CoV ile enfekte olmuş rhesus maymunları üzerinde yapılan önceki çalışmalar, daha yaşlı al yanaklı maymunların, genç yetişkin rhesus maymunlarından daha şiddetli patolojik reaksiyonlara yol açarak, doğuştan gelen bağışıklık yanıtında bir artışa neden olabileceğini göstermiştir.
Bu çalışmada, orta yaşlı ve yaşlı hastalar, daha genç hastalara göre başvuru sırasında daha düşük lenfosit sayılarına ve daha yüksek CRP düzeylerine sahipti. Bununla birlikte, bu hastaların hiçbiri ciddi bir hastalık geliştirmedi ve bu hastalar arasında yaş ve hastanede kalış süresi açısından önemli bir fark yoktu.
Araştırma ekibi ayrıca nötralize edici antikor titrelerinin kan lenfosit sayımları ile negatif korelasyon gösterdiğini ve kan CRP seviyeleri ile pozitif korelasyon gösterdiğini gözlemledi, bu da hümoral cevabın hücre yanıtı disfonksiyonu veya hasar durumunda önemli bir rol oynayabileceğini düşündürüyor. Yaşlı hastaların kan CRP düzeyleri daha yüksek ve kabul sırasında lenfosit sayıları daha düşüktür, bu da doğuştan gelen bağışıklık yanıtının genç hastalardan daha güçlü olduğunu düşündürmektedir. Bu yaşlı hastalarda, yüksek düzeyde nötralize edici antikorlar, güçlü bir bağışıklık tepkisinin sonucu olabilir.
Bununla birlikte, yüksek seviyelerde nötralize edici antikorların, bu hastaları şiddetli ve kritik bir duruma ilerlemekten koruyup koruyamayacağı, kapsamlı bir değerlendirmeyi hak etmektedir. Ancak bu çalışmada, ağır ve kritik hastalar, numuneler alınmadan önce pasif antikor tedavisi aldıkları için çalışmadan çıkarıldı.
Makale, bu çalışmada, araştırma ekibinin, nötralize edici antikorların COVID-19 hastalarında virüs temizliği veya hastalığın ilerlemesi üzerindeki etkisini doğrudan değerlendiremeyeceğini hatırlatıyor. Bu sorunu çözmek için daha kapsamlı araştırmalar yapılmalıdır.
Makaleye bağlantı: https://www.medrxiv.org/content/10.1101/2020.03.30.20047365v1
