Salgın Önlemenin Yeni Yaygınlaştırılması Shanghai Research Virus Test Kitleri 30'dan fazla ülkeye ihraç edilmektedir, teknik sırlar nelerdir
Salgın küresel olarak yayıldıkça, yeni koronavirüs nükleik asit tespit kitlerine olan talep artıyor. Son zamanlarda Shanghai Zhijiang Biotechnology Co., Ltd. tarafından geliştirilen virüs tespit kiti (floresan PCR yöntemi) AB CE sertifikasını aldı ve İtalya, Fransa, Almanya, Japonya ve Güney Kore dahil olmak üzere 30'dan fazla ülkeye ihraç edildi. Wuhan'daki "savaş salgınında", bu şirket tarafından geliştirilen tam otomatik nükleik asit algılama ön işleme sistemi ve reaktifler de büyük başarılar elde etti. 10 cihaz, günde 5.000 numuneye kadar testi tamamlayabilir.
Virüs tespiti için floresans PCR'nin bilimsel prensibi nedir? Tam otomatik test ekipmanı neden bu kadar verimli? Jiefang Daily · Shangguan News muhabiri, Zhijiang Biyolojisinden iki uzmanla röportaj yaptı.
Zhijiang Biyolojik Araştırma ve Geliştirme Merkezi müdür yardımcısı Zhang Jie'ye göre, PCR, polimeraz zincir reaksiyonu anlamına gelir ve temel prensibi, yüksek sıcaklıklarda erimek ve düşük sıcaklıklarda bağlanmak için çift sarmallı DNA'nın (deoksiribonükleik asit) özelliklerini kullanmaktır. Vücuttaki DNA replikasyonu sürecini taklit edecek değişiklikler. Bu teknoloji, antik fosillerdeki DNA'yı, tarihi figürlerin kalıntılarını, şüphelilerin saç, deri ve vücut sıvılarını tespit etmek ve viral nükleik asitlerin belirlenmesi için kullanılabilir.
Virüsü saptamak için floresan PCR kullanmadan önce, araştırmacılar virüsün nükleik asit dizisini analiz etmeli ve viral nükleik aside spesifik olarak bağlanan primerleri (yaklaşık 20 nükleotidden oluşan oligonükleotid fragmanları) tasarlamalıdır. "Bu kitin geliştirilmesindeki en kritik adım, viral nükleik aside spesifik olarak bağlanabilen primerler bulmaktır." Zhijiang Biotech başkanı Dr. Shao Junbin, primerin hedef nükleik aside zayıf bağlanması durumunda kitin hassasiyetini etkileyeceğini söyledi; Primerler ayrıca diğer patojenlerin nükleik asitlerine de bağlanabilir ve bu da kitin özgüllüğünü azaltır.
DNA polimerazın etkisi altında, primerler genişler ve yüksek sıcaklıkla eriyen DNA ile birleşerek iki iplik haline gelir. PCR döngüleyicinin sıcaklığı tekrar arttığında, DNA tekrar erir ve primerler uzayıp onunla birleşerek 4 iplik haline gelir. Sıcaklık yükselip alçaldıkça, virüsteki nükleik asit fragmanları Monkey King klon tekniği gibi katlanarak çoğaltılır, yani fragman sayısı 1'den 2'ye, 2'den 4'e, 4'ten 8'e değişir ... 30 döngüden sonra, Teorik parça sayısı, orijinal sayının 230 katına ulaşacaktır.
Amplifiye edilmiş viral nükleik asit nasıl tespit edilir? Bu, floresan problara (flüoresan raportörlü oligonükleotid fragmanları ve yaklaşık 30 nükleotidden oluşan söndürücü gruplar) bağlıdır. Primerler gibi, viral nükleik aside de bağlanabilir ve bozunmadan önce ışık yaymaz. Amplifiye edilen daha spesifik fragmanlar ve ne kadar fazla floresan probu bozulursa, cihaz tarafından tespit edilebilen, yayılan floresan miktarı o kadar yüksek olur.
Yeni koronavirüsün nükleik asidi, çift sarmallı DNA virüslerine göre dizi varyasyonuna daha yatkın olan tek sarmallı bir RNA'dır. Bu nedenle kiti geliştirirken, yeni koronavirüsü diğer patojenlerden tamamen ayırt edebilen segment için hedef seçmenin yanı sıra, kaçırılan tespitleri önlemek için segment için kolayca değiştirilemeyen primerler ve floresan problar tasarlamak da gereklidir.
Son zamanlarda, Çin'de viral nükleik asit için negatif test eden ancak klinik olarak yeni koroner pnömoni olduğundan şüphelenilen bazı "yanlış negatif" vakalar olmuştur. Bu bağlamda Zhang Jie, "yanlış negatiflerin" ana nedenlerinin iki yönü içerdiğini açıkladı:
Birincisi, yeni koronavirüsün insan vücudundaki dağılımı ve içeriği ile semptomlar arasındaki ilişki hala net değil. Özellikle hastalığın erken evresinde hastada öksürük olmayabilir ve üst solunum yolundaki virüs miktarı çok azdır, bu nedenle nazofaringeal sürüntü örneğinin test sonucu muhtemelen negatif olacaktır.
İkincisi, virüs tespitinin numune toplama, virüs inaktivasyonu, kapalı inceleme, nükleik asit ekstraksiyonu, nükleik asit tespiti ve diğer bağlantıları içermesidir. Bağlantıların herhangi birindeki herhangi bir sorun, yeterli ve etkili viral nükleik asidin çıkarılamamasına yol açarak "yanlış Olumsuz "durum.
Eski neden göz önüne alındığında, Zhijiang Biological, nitelikli hastanelerin, yüksek rastlantısal burun ve boğaz sürüntüleri kullanmak yerine şüpheli hastalardan alt solunum yolu balgamını toplamasını önermektedir. İkinci nedenle, şirket, yerli ve yabancı viral nükleik asit testinin, test yapanların güvenliğine de yardımcı olan kararlı virüs numunelerini sağlamak için standartlaştırılmış işlemleri ön uca genişletmesini önermektedir; aynı zamanda, test sonuçlarının analizine yapay zeka da dahil edilebilir. Test uzmanlarının negatif ve pozitif sonuçlar arasında daha doğru kararlar vermesine yardımcı olun. Zhijiang Biological'ın test sonuçlarını değerlendirmek için yapay zeka algoritmalarını denemek için bazı yerli hastanelerle işbirliği yaptığı anlaşılıyor.
Virüs tespit kitlerine ek olarak, Zhijiang Biotech tarafından geliştirilen tam otomatik nükleik asit tespit ön işleme sistemi de yerli "savaş salgını" na katıldı. 10 Şubat'ta, 10 otomatik nükleik asit tespit ön işleme sistemi, deniz yoluyla Şanghay'dan Wuhan'a ulaştı. Yaklaşık iki metre uzunluğunda, bir metre genişliğinde ve bir metre yüksekliğindedirler, ev tipi donduruculara benziyorlar ve üç nükleik asit ekstraksiyonu, test reaktifi hazırlama ve numune ekleme işlemini otomatik olarak tamamlayabilirler. Bu gelişmiş ekipmanla, test personelinin, nükleik asit ekstraksiyonunu tamamlamak için bilgisayardaki istemlere göre yalnızca numuneleri ve reaktifleri makineye koyması yeterlidir. Manuel işlemle karşılaştırıldığında, nükleik asidin makine ekstraksiyonunun etkinliği büyük ölçüde geliştirilir, doğruluk oranı daha garanti edilir ve numuneyle temas şansı azalır, bu da enfeksiyon riskini azaltabilir.
Otomatik ekipman yardımı ile nükleik asit ekstraksiyonundan test sonuçlarına kadar geçen süre yaklaşık 4 saattir. Hubei medyası bir hesap hesapladı: Şangay tarafından bağışlanan 10 cihaz, tam kapasitede çalışırken günde 5.000 numuneyi tespit edebiliyor; bu, önceki aşamadaki Wuhan'daki günlük tespit hacminin üçte birine eşittir ve yerel bölgenin "uygulamalara" ulaşmasına yardımcı olur. "Tüm denetimleri inceleyin, günlük yerleşimleri temizleyin" hedefi.
Şimdiye kadar, Zhijiang Biyolojik ürünleri 30'dan fazla ülkeye ihraç edildi. Salgın dünya çapında yayılırken, Shanghai Research virüs tespit kitlerinin daha fazla ülkeye ihraç edilmesi ve bu da Şangay'ın bilimsel ve teknolojik gücünün salgına karşı küresel mücadeleye katkıda bulunması bekleniyor.
Sütun Editörü: Huang Haihua Metin editörü: Yu Taoran Fotoğraflar: Shenyang, Lai Xinlin
