Bdellovibrio kullanılırken en iyi sonuçlar nasıl elde edilebilir?
Son iki yılda, Bdellovibrio ürünlerinin kullanımı aniden tekrar popüler hale geldi ve piyasada sıvı Bdellovibrio, toz haline getirilmiş Bdellovibrio ve dondurularak kurutulmuş Bdellovibrio dahil olmak üzere çeşitli Bdellovibrio ürünleri ortaya çıktı. Toz, özellikle Budovibrio'nun dondurularak kurutulmuş tozu yeni bir tanıtım trendi haline geldi, ancak aynı zamanda Budovibrio'nun dondurularak kurutulmuş tozudur. Bazı ürünler çok iyi kullanılır, bazı ürünler ise etkili değildir. Üreticilerin bile B. vibrio ile ilgili ürünler hakkında soruları var. Bu makale, çiftçilerin, distribütörlerin ve şirketlerin B'yi daha iyi anlayıp kullanmaları için bazı fikirler sunmayı umuyor.
Metin / Resim Nanjing New Biological Products Co., Ltd. Zhao Haiyong
1. Bdellovibrio tam olarak nedir?
(1) Budovibrio hakkında temel bilgiler
1. Keşif ve adlandırma
Bdellovibrio ilk olarak Stolp ve Petzold tarafından 1962'de Pseudomonas'ın barbunya yaprağı yanık bakterisinde keşfedildi ve daha sonra toprak ve kanalizasyondan izole edildi. Bu nedenle, Bdellovibrio'nun keşfinden bu yana sadece 56 yıl geçti.
Bdellovibrio, Bdellovibrio bakteriyovorus olarak adlandırıldı. Bunlar arasında, Bdello kelimesi "sülük" anlamına gelen Yunanca kelimeden gelir, "vibrio" "vibrio" anlamına gelir ve "bakteriovorus" türü "bakteri" anlamına gelir. Adı çok ilginç. "Leech" onun fizyolojik eylemlerinden bazılarını temsil ediyor. Bdellovibrio'nun yırtıcı yaşam tarzı çok özeldir. Diğer bakterileri parazite eden ve parçalanmalarına neden olabilen bir bakteri türüdür - lütfen unutmayın "Çatlamak", hepsini yememek.
2. Bdellovibrio nedir
Bdellovibrio, aynı zamanda bakteriyofagöz Bdellovibrio olarak da adlandırılır. Budovibrio Budovibraceae, Proteobacteria cinsine aittir ve bakterilerin tüm morfolojik özelliklerine sahiptir:
Tek hücre, yay veya virgül, bazen sarmal. 0.3-0.6 × 0.8-1.2 mikron veya basil uzunluğunun sadece 1 / 3-1 / 4'ü, diğer bakterilerin flagellalarından 3-4 kat daha kalın olan terminal flagella ve flagella'nın karşı ucunda başak benzeri kirpikler denir. Bakterilerin tanınması ve konağın adsorpsiyonu ile ilgili olan "enfekte tığ" dır. Sporları aktiftir. Gram boyası negatifti.
Özellikle belirtilmesi gereken birkaç nokta var
Birincisi, Bdellovibrio sıradan bakterilerden daha küçüktür ve bakteri filtresinden geçebilir, bu nedenle sıradan mikroskoplar onu göremez, en azından yağlı aynalar ve hatta boyama kullanmanız gerekir.
İkinci olarak, bir faz kontrast mikroskobu altında, Budovibrio sp. Elektron mikroskobu ile gözlemlenen Bdellovibrio, esas olarak yay ve çubuk şeklindedir.
Üçüncüsü, küçük boyutu nedeniyle, 20.000 rpm'den küçük bir santrifüj, Budovibrus konsantrasyonu için anlamsızken, 20.000 rpm'lik bir santrifüj genellikle sadece laboratuvarlarda bulunur ve küçük olması kolaydır. Gerçek üretim açısından, uygulamanın hala biraz uzaklığı var.
3. Yaşam tarzı ve büyüme gereksinimleri
Parazitik ve fakültatif parazitik Bdellovibrio türleri vardır ve çok azı saprofitiktir. Parazitik olmayan saprofitik yaşam, pepton ve maya ekstraktı ortamında büyüyebilir ve çoğalabilir. Doğadan izole edilen Budovibriosların tümü parazit bağımlıdır Şimdiye kadar, parazitik olmayan hiçbir tür doğrudan doğadan izole edilmemiştir. Ev sahibine bağlı olmayan Budovibrios, ancak laboratuvar koşullarında yaşayabilir.
Parazitik Bdellovibrio bakterilerinin büyümesi genellikle pH 6.0-8.5 gerektirir; sıcaklık 23-37 ° C'dir, 12 ° C'den düşüktür ve 42 ° C'den yüksek olduğunda büyümez; proteini stabil bir şekilde parçalayabilir, genellikle karbonhidrat kullanmaz, ancak peptit kullanır, Karbon kaynağı ve enerji olarak amino asit; jelatini sıvılaştırabilir; kesinlikle aerobiktir.
Bu yüzden lütfen aşağıdaki noktalara dikkat edin:
İlk olarak, sıcaklık uygun aralıkta olmadığında, Bdellovibrio büyümez, bu nedenle onu kullanırken bu nokta tam olarak dikkate alınmalıdır. Örneğin mart ve nisan aylarında fide olarak kullanılırsa etkisi iyi olmaz, karışımla beslenirse bağırsak bakteri kontrolüne olumlu etki eder.
İkincisi, Bdellovibrio'nun yayılması oksijen gerektirir ve onu kullanırken sabah 8-10'da kullanılması tavsiye edilir, böylece yeterli çözünmüş oksijen elde edilebilir. Ayrıca oksijen tüketimi çok şiddetli bir düzeye ulaşmayacaktır çünkü çoğalması genellikle 4-6 saat sürer.
4. Parazitliğin özgüllüğü
Bdellovibrio ve konakçı hücreler genellikle belirli bir özgüllük gösterir. Bununla birlikte, bazılarının özgüllüğü zayıftır ve birçok bakteri türünü istila edebilir. Örneğin, farklı Bdellovibrio suşları, her türlü farklı bitki patojenik bakterisini istila edebilir.
Bu açıdan bakıldığında geniş spektrumda bakteriyofajlardan (virüsler) ve bakteriyosinlerden (proteinler) daha iyidir. Aslında, Bdellovibrio bakterisi birçok farklı aileyi ve cinsi enfekte edebilir, ancak genel olarak belirli bir önyargısı vardır, örneğin, Gram negatif bakterilerin çoğunu (Shigella, Salmonella, Escherichia gibi) enfekte edebilir. , Erwinia, Proteus, Vibrio, Pseudomonas, Leptospira ve diğer mikroorganizmalar), ancak yalnızca birkaç Gram-pozitif bakteri (Streptococcus faecalis, Lactobacillus, vb.) Bacillus subtilis'i parçalamaz ve ayrıca bazı mantar ve enterovirüslere karşı belirli litik aktiviteye sahip olduğu bildirilmiştir.
Parazitizmin özgüllüğünün gerçek kullanım yöntemimiz üzerinde de büyük bir etkisi vardır, yani Budovibrio bakterileri iyi bakteri veya kötü bakteri ne olursa olsun saldırır mı? Durum böyleyse, bizim tarafımızdan kullanılması zordur, ancak aslında, pratik uygulamalar için bize daha fazla olanak sağlayan belirli bir eğilimi vardır.
Guo Yanbiao (2016) tarafından yapılan bir çalışmada, Budovibrus BDW03'ün test grubunda kalkanı bağırsakları üzerinde hiçbir kontrol etkisi olmayan 8 cinsinin (% 53,3) bulunduğunu ve bu 8 cinsin çoğunun Gram-pozitif bakteri olduğunu göstermiştir. (6/8). Buna ek olarak, 60 gün kalkanı yemle karıştırılmış laktik asit bakterileriyle besledikten ve BALO'ları sıçrattıktan sonra, laktik asit bakterilerinin ve BALO'ların, kalkanın bağırsak florasındaki gram negatif bakteriler üzerindeki kontrol etkisi (toplam bakteri cinsinin sırasıyla% 33,3'ünü ve% 26,7'sini oluşturur). ) Gram pozitif bakteriler üzerindeki kontrol etkisinden üstündür (sırasıyla toplam bakteri cinsinin% 26.7'sini ve% 20.0'ını oluşturur) Bu ayrıca dolaylı olarak Bdellovibrio'nun bakteri parçalanmasında belirli bir önyargıya sahip olabileceğine işaret eder.
Xu Qin ve diğerleri (2009) tarafından yapılan çalışma, Bdellovibrio ve Rhodotorula glutinosa bakteriyofajlarının eklenmesinin test etkisinin ideal olmadığına işaret ederek iki suş arasında belirli bir antagonistik etki olduğunu göstermektedir. Bakteriyofaj Budomonas sphaeroides ve Rhodopseudomonas sphaeroides'in (bir tür kükürt içermeyen mor fotosentetik bakteri Rhodopseudomonas) birlikte kullanılması, su kalitesini arındırmak ve hastalıkları önlemek için mükemmel umutlar göstermektedir. Bu grup etkili bir şekilde emebilir. Amonyak azotu ve sülfür gibi zararlı maddeler. Bu aynı zamanda Bdellovibrio'nun bazı fotosentetik bakterilerle doğrudan karıştırılabileceğini ve bu da kullanım kolaylığını büyük ölçüde artırdığını göstermektedir.
Ayrıca Chen Zhang ve diğerleri (2003), yengeç yetiştiriciliğinde aralıklarla fotosentetik bakteriler ve Budovibrio kullandılar: Budovibrio bakteriyofajlarını ve fotosentetik bakterileri 20 günde bir, fotosentetik bakterileri 1 hafta boyunca kullanın. Bakteriyofaj Bdellovibrio kullanıldı ve deney süresi 3 aydı. Bdellovibrio konsantrasyonu 107cfu / mL ve fotosentetik bakteri konsantrasyonu 109cfu / mL idi. Bu tür aralık kullanımının etkisi de çok iyidir. 25 gün sonra, kültürlenmiş Çin mitten yengecindeki toplam bakteri sayısı, kontrol havuzundakinden 2 kat daha azdır. 70 gün sonra, deney grubundaki toplam bakteri sayısı, kontrol havuzundakinden 3 kat daha azdır. Havuzdaki KOİ, amonyak azotu ve sülfit önemli ölçüde azaltıldı, bu da Çin mitten yengeçlerinin hayatta kalma oranını etkili bir şekilde iyileştirdi, ancak bu makale bunların nasıl karıştırılacağını tartışmıyor.
Bdellovibrio, diğer uzmanlardan alınan bazı sonuçlarla birleştiğinde, temelde gram negatif basilleri tercih ediyor.Aynı zamanda, maya ile karıştırılmamasının en iyisi olduğu, ancak fotosentetik bakterilerle karıştırılabileceği mevcut kağıtlardan da bilinmektedir. Elbette bunları ayrı ayrı kullanmak en iyisidir. Aynı zamanda bir de kilit nokta var, yani 20 günlük bir döngü içerisinde Budovibrio'nun su kütlesi üzerindeki düzenleme ve kontrol etkisi yaklaşık 2 haftaya ulaşabiliyor.
5. Bdellovibrio'yu saptamak için neden tek katmanlı plak yöntemi yerine çift katmanlı plak kullanılıyor?
Bunun ana nedeni, petri kabının tabanının çok düz olmamasıdır, bu nedenle alt katman olarak tabanı düzleştirmek için az miktarda kültür ortamı enjekte edin ve neredeyse yatay bir taban elde edilecek ve ardından faj ve bakteri karışımının orta (ince) üst katman olarak enjekte edilir. Bu, gözlem nesnelerini aynı düzlemde yapar ve bu da plakların gözlemlenmesine, ayrılmasına ve saflaştırılmasına daha elverişli hale gelir.
Aslında tek tabakalı levha yöntemi ile çift tabakalı levha yöntemi ile oluşturulan plakların karşılaştırması şu şekildedir:
6. Güvenlik sorunları
Wang Yali (2007) tarafından yapılan bir çalışma, izole edilmiş Bdellovibrio suşu BD5W'nin 107 pfu / mL konsantrasyonda gavaj yoluyla farelere uygulandığına işaret etti.Test grubu ve kontrol grubu sağlıklıydı, bu da bakteriyofaj Bdellovibrio'nun fareler üzerinde toksik etkisi olmadığını kanıtladı.
Lin Mao ve diğerleri (2010) tarafından yapılan çalışma da Bdellovibrio'nun mikroekolojik bir ajan olarak toksik olmayan ve zararsız özelliklerini doğruladı.
Xu Yi (2011), bakteriyofajlar Bdellovibrio BD57'nin akut toksisite testi çalışmasında, farelerin "Veteriner İlaç Testi Özeti Teknik Spesifikasyonları" nın gerekliliklerine göre akut toksisite testi için seçildiğine dikkat çekti. Akut toksisite testleri sırasıyla gavaj ve intraperitoneal enjeksiyon ile gerçekleştirilmiştir Test sonuçları, bakteriyofaj Bdellovibrio BD57'nin fareler üzerinde toksik etkisinin olmadığını göstermiştir.
Chen Liyun (2012) ayrıca Budovibrozun ökaryotik hücrelere toksik olduğuna dair herhangi bir rapor bulunmadığını, fareler, kobaylar, tavşanlar ve diğer hayvanlar üzerinde toksik etkisi olmadığını ve maymun böbreği ve Hela hücrelerinin doku kültüründe hücrelere neden olmadığını belirtmiştir. Lezyonlar. Şimdiye kadar, ilgili raporlar Bdellovibrio'nun insanlar ve bazı hayvanlar için toksik olmadığını göstermiştir.
2. Bdellovibrio'nun parçalama mekanizması
Bdellovibrio'nun bakterileri barındırmak için parçalama süreci genel olarak beş adıma bölünür: tanıma, adsorpsiyon ve istila, konumlandırma ve sentez, replikasyon ve liziz. Genel şema aşağıdaki gibidir:
1. Kimlik
Bu süreçte, ilginçtir ki, Bdellovibrio flagella üzerinden atlama hareketini başarabilir ve ev sahibi bakteriye hızlı bir şekilde hareket edebilir, flagellar uçtan ev sahibi bakterinin yüzeyine yapışır. Flagellum burada çok önemli bir rol oynamaktadır.Aslında, bazı fermentasyon deneylerinde, fermentördeki yaprak bıçaklarının hızı çok hızlı olursa ve flagella'ya zarar verirse, Budovibrio bakterisinin artık konakçıya saldıramayacağı bulunmuştur.
2. Adsorpsiyon ve istila
Adsorpsiyon ve istila amacına ulaşmak için, Budovibrio bakterileri saniyede 100 devirden fazla bir hızda mekanik bir "delme" etkisi üretecek ve Budovibrio'nun istilası sırasındaki kasılma, konakçı bakterinin periplazmik alanına girecektir.
3. Konumlandırma ve sentez
Birincisi, Bdellovibrio'nun kamçısını atacağı, diğeri ise konakçı bakterinin bir blucoplasta dönüşeceği.
4. Kopyala
Budovibrio bu aşamada çoğaltma ve yeniden üretmeyi başarmıştır.
5. Çatlama
Son süreçte, Bdellovibrio flagella sentezleyecek, konağın hücre zarını lize edecek ve tüm Bdellovibrio'yu serbest bırakacaktır.
Elektron mikroskobunun bazı resimleri aşağıdaki gibidir:
3. Bdellovibrio'nun koruma yöntemleri üzerine araştırma
Huang Wen ve arkadaşları (2002), beş Budovibrio bakterisinin koruma yöntemleri üzerine karşılaştırmalı bir çalışma yaptılar ve dondurarak kurutma yönteminin, beş koruma yöntemi arasında en iyi koruma etkisine sahip olduğunu ve bir aydaki diriliş oranının% 100 olduğunu belirttiler. Hem 4 ° C besiyerini koruma yöntemi hem de -20 ° C gliserin koruma yöntemi 17 aylık% 67 dirilme oranına sahiptir.
Tabii ki, açık olması gereken bir şey, dondurarak kurutma tamamlandıktan sonra 4 ° C'de saklanmasıdır.
Ek olarak, Deng Lu ve diğerleri (2008), farklı koruma çözümlerinin, koruma sıcaklıklarının ve koruma taşıyıcılarının seçiminin Bdellovibrio'nun uzun süreli korunması üzerindeki etkisini ve ayrıca optimize edilmiş koruma koşulları altında Bdellovibrio'nun geri kazanım oranı ve geri kazanımını inceledi. Fagositik yetenek test edildi ve koruma süresi boyunca konakçı bakterinin hayatta kalması ile Bdellovibrio'nun hayatta kalması arasındaki etkileşim üzerine ilk rapor yapıldı. Sonuçlar şunu gösterdi: koruyucu çözelti olarak 1 / 100NB gibi düşük besleyici sıvılar, taşıyıcı olarak agar kullanarak, 4 ° C'de uygun miktarda konakçı bakteri ekleyerek, Bdellovibrio bakterileri 2 yıldan daha uzun süre saklanabilir ve koruma süresi boyunca iyileşme oranı ve plak sayısı Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında son derece önemli bir gelişmeye sahiptir (P < 0.01).
Şu anda, oda sıcaklığında saklama üzerine araştırma bulunamamıştır, bu nedenle Bdellovibrio ürünlerinin 4 'lik bir ortamda depolanması önerilmektedir.Aslında, sıradan dikey buzdolapları bu koşulu karşılayabilir.
Dördüncü olarak, Bdellovibrio'nun kullanımı
Pratikte Bdellovibrio nasıl kullanılmalıdır? Bu, maksimum etkiyi gerçekten uygulamak için pratik konular göz önünde bulundurulurken Bdellovibrio bakterisinin özellikleriyle birleştirilmelidir. Gerçek kullanım önerileri aşağıdaki gibidir:
1. Tahriş edici olmayan biyolojik dezenfeksiyonun etkisini elde etmek için, kültürlü tüm kabuklu hayvanların (kerevit, yengeç, beyaz karides vb.) Bombardımanı döneminden önce kullanılması özellikle tavsiye edilir.
1. Bombardıman dönemi bu çiftlik hayvanları için özellikle hassas bir dönemdir ve özellikle sıcaklık yükseldiğinde enfeksiyonlara yatkındır.Ayrıca, bombardıman döneminde kabuklular özellikle hassastır ve birçok dezenfektan kullanılamaz. Evet, Budovibrus güvenli ve tahriş edici olmayabilir.Kullanım için yaklaşık 2 gün önceden kullanılması tavsiye edilir.Önce biraz kalsiyum takviyesi, sonra Budovibrus kullanmanız daha iyi olur çünkü belirli miktarda kalsiyum iyonu Bdellovibrio'nun üremesini teşvik edebilir.
2. İnatçı hastalıkları tedavi etmek için kimyasal dezenfektanlarla işbirliği yapmayı teşvik edin.
Yetiştiriciliğin orta ve geç dönemlerinde, sıcaklığın yüksek olduğu bazı hastalıkların tedavisi çok zordur.Başlıca özellikleri durdurulamaz ve tekrarlaması kolaydır.Başlıca nedeni, kimyasal dezenfektanların hızlı bir sterilizasyon etkisine sahip olmasına rağmen, geri tepmelerinin de çok hızlı olmasıdır. Sıradan kimyasal dezenfektanlar veya ulusal standart antibiyotikler için, kullanımdan 24-48 saat sonra, toplam bakteri sayısı ve hatta su gövdesindeki vibrio sayısı, kullanım öncesine göre daha yüksek olabilir, bu da tedavisinin zor olmasının ana nedeni olabilir.
Sterilizasyonun hızlı ve uzun ömürlü olması için kimyasal dezenfektan ve Budovibrio kombinasyonunun kullanılması gerekir. Öncelikle, dip ve su yüzeyini kapsamlı bir şekilde dezenfekte etmek için kimyasal dezenfektanlar kullanın ve aynı zamanda iç dezenfeksiyon için ulusal standart antibiyotikler alın.Etkisini gördükten sonra Budovibrio'yu 1-2 kez sürekli kullanın, önemli ölçüde farklı terapötik etkiler görebilirsiniz. Kimyasal dezenfektan hızlı bir şekilde bastırma etkisine sahip olduğundan ve Budovibrio zararlı bakterileri uzun süre bastırma etkisine sahip olduğundan ve güçlü kombinasyon zararlı bakterilerin üremesini etkili bir şekilde engelleyebilir.
3. İnsidansı azaltmak için önleyici kullanım için tavsiye edilir
Potasyum hidrojen persülfat baz modifikasyon tabletlerinin kullanılmasının ardından yararlı bakteriler ertesi gün büyük dozlarda kullanılabilir.Bu zamanda Budovibrio ve fotosentetik bakterilerin birlikte kullanılması tavsiye edilir, bunun uygulanabilirliği deneylerle kanıtlanmıştır.
Elbette, önce 20 günlük bir döngüde fotosentetik bakterileri kullanabilir ve daha sonra bir hafta sonra orijinal dondurularak kurutulmuş Budovibrio tozunu kullanabilirsiniz, bu da daha iyi sonuçlar sağlayabilir.
He Yijin ve diğerleri (1996) tarafından yürütülen bir dış mekan küçük su kütlesi testinin sonuçları, Bdellovibrio kullanan su kütlesinde DO ve p H'ye ek olarak nispeten kararlı olduğunu, diğer su kalitesi fiziksel ve kimyasal göstergeler NH4 + -N, NO2 - N, Toplam fosfor ve şeffaflık az çok değişti.
4. Enteriti önlemek için malzemelerin karıştırılması önerilir
Bu ürün ilk olarak çiftlik hayvanlarında ve kümes hayvanlarında bir veteriner ilacı olarak tanıtıldı ve çoğu, özellikle yeni doğmuş domuz yavruları ve tavuklar için çiftlik hayvanlarında ve kümes hayvanlarında enteriti tedavi etmek için kullanıldı.
Peki su ürünlerinde nasıl tanıtılmalı? Aslında, Bdellovibrio esas olarak Escherichia coli'nin neden olduğu ilgili enterit hastalıklarına yöneliktir, çünkü Bdellovibrio'yu fermente etmeden önce Escherichia coli üretmek ve sonra onu aşılamak gerekir.Escherichia coli, B.'nin en sevilen bakterilerinden biridir. Bu tip enteritin tedavisindeki etkisi daha iyi olacaktır.
Ayrıca Budovibrus kendisi bir hazine evidir.Protein içeriği zengindir, kuru hücre ağırlığının% 60-65'ine ulaşır ve DNA içeriği% 5'tir.
5. Nanjing Yeni Biyolojik Ürünler Co., Ltd.'ye Giriş
Nanjing New Biological Products Co., Ltd. kuruluşundan bu yana 11 yıllık bir geçmişe sahiptir.Şirketin kurucusu Xu, her zaman sektörde su ürünleri için Budovibrosis'e maruz kalan ilk yerli personelden biridir. Müşterilere daha iyi hizmet verebilmek için şirket, müşterilerine daha iyi hizmet verebilmek için Ekim 2018'de büyük ölçekli bir dondurarak kurutma makinesine (tek bir dondurarak kurutma 10.000 şişe) yaklaşık bir milyon yatırım yaptı.
Budovibrio'yu fermente eden çok fazla yerli şirket yok, aynı zamanda büyük dondurarak kurutucuya sahip az sayıda şirket var.Yıllar süren keşiflerden sonra, yeni şirket Budovibrio tohum üretimi, fermantasyonu ve dondurarak kurutmanın tüm üretim sürecini tamamladı. , Güvenilir kalite ve istikrarlı etkiler elde ederken, müşterilere Budovibrio'nun orijinal "orijinal dondurularak kurutulmuş" ürünlerini sağlayabilir.Aynı zamanda, yeni ve eski müşterileri sorgulamak ve bizi ziyaret etmek için içtenlikle karşılıyoruz.
